GeneJect™

Odczynnik do transfekcji DNA, siRNA i miRNA.
Numer katalogowyWielkośćCena nettoIlość
4100-01 100 µl
    229,00 PLN
InstrukcjaMSDSBroszura
4100-05 500 µl
    999,00 PLN
4100-15 1,5 ml
    2 499,00 PLN

Zalety produktu

  • Nadaje się do transfekcji DNA, siRNA i miRNA
  • Niski poziom toksyczności dla komórek
  • Wydajna transfekcja wielu linii komórkowych i komórek pierwotnych

Opis

GeneJect™ jest uniwersalnym odczynnikiem do transfekcji zdolnym do wprowadzania do komórek zarówno cząsteczek plazmidowego DNA jak również krótkich oligonukleotydów takich jak siRNA czy też inhibitorów miRNA.

GeneJect™ wykazuje obniżoną toksyczność wobec komórek w porównaniu z lipofektyną, przy czym toksyczność wzrasta przy niskiej konfluencji.

Transfekcja z użyciem GeneJect™ zachodzi wydajnie dla powszechnie znanych linii komórkowych rozmaitego pochodzenia, w tym komórek HeLa, HEK293, PPC-1, HaCaT, A549, BEAS-2B, CCD19Lu, THP-1 i KOP. Pozwala również na wykonanie transfekcji na niskim poziomie w komórkach szczególnie trudnych do przyjęcia obcego materiału genetycznego np: komórek MDBK (Madin Darby Bovine Kidney cells).

GeneJect™ jest odczynnikiem wydajnie wspomagającym transfekcję w wielu rodzajach komórek pierwotnych takich jak ludzkie keratynocyty, fibroblasty, melanocyty oraz monocyty.

100 μl odczynnika GeneJect™ pozwala na wykonanie do 50 odrębnych transfekcji w formacie 12-dołkowej płytki do hodowli tkankowej.

 

Porównanie wydajności transfekcji DNA odczynnika GeneJect™ z wiodącymi produktami na rynku

 

Rys. 1. Detekcja nanokompleksów GeneJect™ – plazmidowe DNA w wybranych liniach komórkowych

Komórki były transfekowane na 12-studzienkowej płytce plazmidem pEGFP w ilości 1 μg DNA oraz 2 μl odczynnika Gene Ject™na jedną studzienkę. Obecność białka GFP sprawdzano pod mikroskopem fluorescencyjnym po 24 godzinach od trasnfekcji.

 HEKMDBK
GeneJect™
jetPRIME®

HEK - Human embryonic kidney cells - linia łatwa do prowadzenia transfekcji. MDBK - Madin Darby bovine kidney cells - linia komórkowa bardzo oporna na transfekcję.

 

Porównanie wydajności transfekcji miRNA odczynnika GeneJect™ z wiodącymi produktami na rynku

 

Rys. 2. Detekcja nanokompleksów GeneJect™ – miRNA w wybranych liniach komórkowych

Kompleksy miRNA znakowane barwnikiem Dy547 były wprowadzane do badanych komórek poprzez transfekcję z odczynnikiem GeneJect lub pochodną lipofectaminy siSPORT-NeoFX w stężeniach 30 nM. Po upływie 24 godzin od transfekcji komórki były barwione odczynnikiem DAPI (niebieski) oraz kompleksami Falloidyna - Alexa FluorA488 (zielony).

 A549BEAS-2BCCD19-LuPPC-1
GeneJect™
siPORT
  Dy547 Phalloidin DAPI

A549 - linia ludzkich komórek nabłonkowych raka płuc typu adenocarcinoma, BEAS-2B - linia ludzkich komórek nabłonka oskrzeli, CCD19-Lu - ludzkie fibroblasty płuc, PPC-1 - linia ludzkich komórek raka prostaty.

 

Wydajność transfekcji siRNA z odczynnikiem GeneJect™

 

Rys. 3. Wpływ na transkrypcję genu IRAK1 po przez analog miR-146a transfekowane z odczynnikiem by GeneJect™

Wybrane linie komórkowe były transfekowane kontrolnym RNA oraz analogiem miR-146a w obecności 30 nM stężenia odczynnika GeneJect™.

Po upływie 48 godzin od transfekcji, oczyszczano całkowite RNA, a następnie przeprowadzono analizę RT-qPCR z życiem starterów swoistych dla transkryptu genu IRAK1. Względne poziomy transkrypcji porównywano do kontroli negatywnej względem każdego typu komórek (=1). Przedstawione wyniki reprezentują średnie wartości z czterech niezależnych doświadczeniach transfekcji. Test Studenta, ** P < 0.01.

PPC-1 - linia ludzkich komórek raka prostaty, A549 - linia ludzkich komórek nabłonkowych raka płuc typu adenocarcinoma, KC - ludzkie keratynocyty pierwotne, THP-1 - linia ludzkich monocytów.

 

Rys. 4. Wydajność transfekcji siRNA z odczynnikiem GeneJect™

Ludzkie keratynocyty pierwotne były transfekowane kontrolnym RNA oraz swoistym siRNA w obecności 30nM stężenia odczynnika GeneJect.

Po upływie 48 godzin od transfekcji, oczyszczano całkowite RNA, a następnie przeprowadzono analizę RT-qPCR z życiem starterów swoistych dla transkryptu genów IRAK1 oraz CARD10. Względne poziomy transkrypcji porównywano do kontroli negatywnej względem każdego typu komórek (=1). Przedstawione wyniki reprezentują średnie wartości z trzech niezależnych doświadczeniach transfekcji. Test Studenta, * P < 0.05.** P < 0.01.

 

GeneJect™